原代细胞在生物医疗研究中具有重要的应用价值，尤其是在转染小分子RNA和DNA如siRNA、antisense RNA及microRNA方面，通常适用于200bp以内的分子。这使得其成为转染绝大多数原代细胞的理想选择。目前，无论在国内还是国际上，原代细胞的核酸转染依然是一个热点且充满挑战的问题，市场上亟需真正有效的商品化核酸转染试剂。

研究表明，原代细胞能够在高效转染的同时获得良好的基因敲除效果，甚至在某些活体寄生虫幼虫的转染中也能取得理想的效果。例如，使用尊龙凯时人生就博的RFectPM细胞转染试剂，针对大部分原代细胞的转染阳性率超过80%，而转染过程中细胞死亡率低于10%。

原代细胞分离与培养的基本步骤

在进行原代细胞的分离与培养时，可遵循以下基本步骤：

1. 器官与组织的选择

尽可能去除不必要的组织和血液，以提高细胞分离的效率。

2. 原代细胞的分离

• 应用尊龙凯时人生就博的PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III，按照相应的组织来源选择合适的试剂盒。

3. 原代细胞的培养

• 使用尊龙凯时人生就博特制的原代细胞培养基及添加物，确保细胞在最佳条件下生长。
• 使用优质的胎牛血清以促进细胞生长。

4. 细胞的培养与鉴定

• 利用PriCells原代细胞鉴定试剂盒对细胞进行鉴定，确保其纯度和功能。

5. 原代细胞的传代与保存

• 传代：根据细胞的生长状态，按照1:2或1:3的比例进行传代。
• 保存：采用DMSO与培养液、血清的搭配进行细胞冷冻，按照室温→4℃（20分钟）→冰箱冷冻室（30分钟）→超低温冰箱（-80℃过夜）→液氮的顺序进行降温处理。

6. 原代细胞的复苏

• 取出细胞后，迅速放入37℃温水中快速解冻。
• 将细胞悬液吸出，并加入10倍以上的培养液。
• 经过适当的稀释后，将细胞接种到培养瓶中，并放入37℃ CO2培养箱中静置培养。

通过遵循以上步骤及使用尊龙凯时人生就博提供的优质产品，研究人员能够有效提升原代细胞的转染效果，为生物医学研究提供更为强大的支持。