第一章:实时荧光定量PCR概述
一、实时荧光定量PCR的概念
实时荧光定量PCR(Real-time PCR)是一种利用荧光信号实时监测整个PCR过程的方法。该技术通过分析CT值和标准曲线来实现对未知模板的定量分析。
二、实时荧光定量PCR的原理
A. 化学原理:该方法将产物DNA分子转化为荧光信号,通过测定荧光值可以直接反映产物DNA的量。
B. 数学原理:利用循环数“n” (CT值) 来计算起始DNA的数量。
四、实时荧光定量PCR的优势
通过比较不同样本中某基因的表达量,实时荧光定量PCR展现出以下优势:
(1) 实时监测PCR反应的整个进程;
(2) 拥有更广泛的检测范围,能够对样本中的起始量进行精确的定量;
(3) 在单个反应管中完成扩增和检测,无需进行PCR后的处理。
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